安捷倫1260 Infinity液相色譜/6410液質(zhì)聯(lián)用助力面膜檢測

2017年，國家食品藥品監(jiān)督管理總局在全國范圍內(nèi)組織抽檢了面膜類化妝品3727批次，抽樣檢驗項目合格樣品3704批次，不合格樣品23批次。不合格項目為檢出含有氯倍他索丙酸酯、倍他米松戊酸酯、氟輕松、倍他米松、地塞米松等糖皮質(zhì)激素物質(zhì)。

糖皮質(zhì)激素 (glucocorticoids) 是一類甾體激素。目前，這類本該嚴(yán)禁使用的藥物正被違法濫用于化妝品中，作為細(xì)嫩美白肌膚的功效成分，其會破壞人體激素平衡，導(dǎo)致多種疾病發(fā)生。本研究針對化妝品中可能使用的 41 種激素品種進(jìn)行多成分同時測定，滿足對這類寬范圍、多組分、復(fù)雜基質(zhì)樣品高通量檢測的需求。

長期使用含有糖皮質(zhì)激素類的化妝品可能導(dǎo)致面部皮膚產(chǎn)生黑斑、萎縮變薄等問題，還可能出現(xiàn)激素依賴性皮炎等后果，《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》（2015年版）規(guī)定其為化妝品中禁用物質(zhì)。

國標(biāo)GBT 24800.2的方法指導(dǎo)中采用的是LC-MS/MS和薄層色譜法。

標(biāo)準(zhǔn)中液相色譜/串聯(lián)質(zhì)譜測定方法適用于化妝品中糖皮質(zhì)激素的定量測定，其檢出限為0.03μg/g，定量限為0.1μg/g。薄層層析法適用于化妝品中糖皮質(zhì)激素的定性篩選。點(diǎn)樣量為10mg時，其檢出限為50μg/g。點(diǎn)樣量為20mg時，其檢出限為25μg/g。

針對該國標(biāo)，安捷倫制定了相關(guān)應(yīng)用方案。

化合物基本信息

糖皮質(zhì)激素基本信息

實(shí)驗部分

樣品前處理

稱取 0.2 g 樣品，加入 3 mL 飽和食鹽水和 2 mL 乙腈（2 次）渦旋提取目標(biāo)物。合并二次提取的 4 mL 乙腈，加入 40 mL 水、0.2 mLK2CaFe(CN)6、0.2 mL 醋酸鋅，混勻后 5000 rpm 離心 10 min。上清液倒入 Bond Elut Plexa 聚合物小柱 60 mg/3 mL（上接 50 mL磨口漏斗），按固相萃取凈化過程獲得液質(zhì)上機(jī)液

固相萃取凈化操作流程圖

色譜和質(zhì)譜條件

儀器： Agilent 1260 Infinity 液相色譜/6410 三重四極桿液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)

色譜柱： Agilent ZORBAX SB-C18，2.1 × 50 mm，1.8 ­m，

部件號 827700-902

進(jìn)樣量：2 ­L

流動相：

A) 含 0.1% 乙酸的水溶液

B) 含 0.1% 乙酸的乙腈溶液

梯度洗脫：時間/min %B

0    32

3.0     32

12.0    75

14.0    75

14.1    32

流速：0.3 mL/min

柱溫：30 °C

分離時間：16 min

離子源：ESI

干燥氣流量：5 L/min

干燥氣溫度：350 °C

霧化器壓力：38 psi

化妝品中 41 種糖皮質(zhì)激素類藥物的色譜圖

化妝品中 41 種糖皮質(zhì)激素類藥物的回收率和精密度

結(jié)論

化妝品劑型多樣、基質(zhì)復(fù)雜，所涉及的 41 種糖皮質(zhì)激素的藥效從弱效、中效、強(qiáng)效到*效，分子特征為 17 碳原子環(huán)戊烷并多氫菲母核上具有不同基團(tuán)的修飾，差異較大。從化妝品中完整提取并純化出數(shù)十種待測目標(biāo)物，并進(jìn)一步建立多組分色譜分離、質(zhì)測定仍有很多困難。因此，好的樣品前處理方法非常關(guān)鍵。本文中使用的 Bond Elut Plexa 小柱，具有純化效果好、回收率高、流速快的特點(diǎn)，可以很好的用在大批量樣品檢測中，可作為化妝品中 41 種糖皮質(zhì)激素檢測的參考方法。