冷凍干燥機在藍耳病病毒標準物質研究中的應用

豬藍耳病又名豬流行性流產和呼吸綜合征，該病病原體為Lelysted病毒，呈卵形、有囊泡、直徑在40-60 nm之間，表面有約5 nm大小凸起，基因組為單股正鏈RNA病毒，該病毒PRRSV基因組具有較強的變異性，傳染性強具有地方流行性，我國將其列為二類傳染病，在防治該病的過程中首先需要快速診斷和檢測藍耳病病毒，在檢測藍耳病病毒時需要統yi的標準物質。

實驗設備

冷凍干燥機FDU-1200

冷阱溫度-45 ℃

除濕量1 L

采用便捷式設計、可置于實驗桌上，操作簡單可分別采用手動和自動運行模式，方便科研人員開展大量的實驗工作。

實驗過程

步

將滅活后的病毒液制備藍耳病病毒核酸檢測標準物質，將純化后的病毒進行無菌檢測、外源性病毒檢測。

第二步

將凍干保護劑與藍耳病病毒液混合搖勻后，移液分裝至10支容量為3 mL的具十字橡膠塞的無菌瓶中（十字塞的十字部分插入瓶中，塞冒懸于瓶口），每支1 mL試樣。

第三步

將10支分裝好的試樣瓶置于-80 ℃的預凍30 min后取出，預凍后樣品瓶置于冷阱溫度已達-45 ℃的凍干倉中，運行真空泵開始凍干，一直到樣品質量不發生變化時凍干結束并在真空狀態下壓蓋密封十字橡膠塞，得到凍干后的樣品。

第四步

采用實時熒光定量RT-PCR方法檢測藍耳病病毒標準物質的均勻性、穩定性，得到藍耳病病毒檢測標準物質也為該病毒定性和定量檢測提供標準物質。